漂白剂是漂白指可使食品中有色物质经化学作用分解转变为无色物质，或使其褪色的测定食品添加剂。食品中常用的漂白漂白剂大都属于亚硫酸及其盐类，通过其所产生的测定二氧化硫的还原作用使之褪色，同时还有抑菌及抗氧化等作用，漂白广泛应用于食品的测定漂白与保藏。我国国家标准规定：残留量以S02计，漂白饼干、测定食糖、漂白罐头不得超过50mg/kg；竹笋、测定蘑菇残留量不得超过25mg/kg；赤砂糖及其他不得超过100mg/kg。漂白
测定二氧化硫和亚硫酸盐的测定方法有盐酸副玫瑰苯胺光度法、碘量法、漂白中和滴定法、测定蒸馏法、漂白高效液相色谱法和极谱法等，而盐酸副玫瑰苯胺光度法和蒸馏法为国家标准GB/T 5009．34—2003方法，下面分别加以介绍。
(一)盐酸副玫瑰苯胺光度法
1、测定原理
亚硫酸盐与四氯汞钠反应生成稳定的配合物，再与甲醛及盐酸副玫瑰苯胺作用生成紫红色配合物，其最大吸收波长为550nm，且色泽深浅在一定范围内与亚硫酸盐含量呈正比，可与标准系列比较定量。结果以试样中二氧化硫的含量表示。
2、试剂
①四氯汞钠吸收液：称取13.6g氯化高汞及6.0g氯化钠，溶于水中并稀释至1000mL，放置过夜，过滤后备用。
②氨基磺酸铵溶液(12g/L)：称取1.2g氨基磺酸铵于50mL烧杯中，用水转入100mL容量瓶中，定容。
③甲醛溶液(2g/L)：吸取0.55mL无聚合沉淀的甲醛(36％)，加水定容至100mL，混匀。
④淀粉指示液：取1g可溶性淀粉，用少许水调成糊状，缓缓倾入100mL沸水中，边加边搅拌，煮沸，放冷备用，此溶液临用时现配。
⑤亚铁氰化钾溶液：称取10.6g亚铁氰化钾[K4Fe(CN)6·3H20]，加水溶解并稀释至100mL。
⑥乙酸锌溶液 称取22g乙酸锌[Zn(CH3COO)2·2H2O]溶于少量水中，加入3mL冰乙酸，加水稀释至100mL。
⑦盐酸副玫瑰苯胺溶液：
a．配制：称取0.1g盐酸副玫瑰苯胺(C19 H18N2C1·4H2O)于研钵中，加少量水研磨使之溶解并稀释至100mL，取出20mL，置于100mL容量瓶中。加盐酸(1+1)，充分摇匀后使溶液由红变黄，如不变黄再滴加少量盐酸至出现黄色，再加水稀释至刻度，混匀备用(如无盐酸副玫瑰苯胺，可用盐酸品红代替)。
b．盐酸副玫瑰苯胺的精制方法：称取20g盐酸副玫瑰苯胺于400mL水中，用50mL盐酸(1+5)酸化，徐徐搅拌，加4～5g活性炭，加热煮沸2min。将混合物倒入大漏斗中，过滤(用保温漏斗趁热过滤)。滤液放置过夜，出现结晶，然后再用布氏漏斗抽滤，将结晶再悬浮于1000mL乙醚-乙醇(10:1)的混合液中，振摇3～5min，以布氏漏斗抽滤，再用乙醚反复洗涤至磁层不带色为止，于硫酸干燥器中干燥，研细后储于棕色瓶中保存。
⑧溶液 (1/2I2)=0.100mol/L。称取12.7g碘用水定容至100mL，混匀。
⑨代硫酸钠标准溶液0.1000mol/L。
⑩二氧化硫标准溶液：
a．配制：称取0.5g亚硫酸氢钠，溶于200mL四氯汞钠吸收液中，放置过夜，上清液用定量滤纸过滤备用。
b．标定：吸取10.0mL亚硫酸氢钠-四氯汞钠溶液于250mL碘量瓶中，加100mL水，准确加入20.00mL碘溶液(0.05m0l/L)、5mL冰醋酸，摇匀，放置于暗处2min后迅速以0.1000mol/L硫代硫酸钠标准溶液滴定至淡黄色，加0.5mL淀粉指示液，继续滴定至无色。另取100mL水，准确加入0.05mol/L碘溶液20.0mL、5mL冰醋酸，按同一方法做试剂空白试验。按下式计算二氧化硫标准溶液浓度：
式中：X——二氧化硫标准溶液浓度，mg/mL；
V1——测定用亚硫酸氢钠一四氯汞钠溶液消耗硫代硫酸钠标准溶液体积，mL；
V2——试剂空白消耗硫代硫酸钠标准溶液体积，mL；
c——硫代硫酸钠标准溶液的摩尔浓度，mol/L；
32.03——1mL硫代硫酸钠(0.1000mol/L)标准溶液相当的二氧化硫的质量，mg/mmol。
⑪SO2使用液：临用前将SO2标准溶液以四氯汞钠吸收液稀释成每毫升相当于2μg SO2。
⑫氢氧化钠溶液20g/L。
⑬硫酸1+71。
3、仪器
分光光度计。
4、操作方法
(1)样品处理
①水溶性固体：样品如白砂糖等，可称取约10.00g均匀样品(样品量可视二氧化硫含量而定)，以少量水溶解，置于100mL容量瓶中，加入4mL氢氧化钠溶液(20g／L)，5min后加入4mL硫酸(1+71)，然后加入20mL四氯汞钠吸收液，以水稀释至刻度。
②其他固体样品：如饼干、粉丝等，可称取5.0～10.0g研磨均匀的样品，以少量水湿润并移入100mL容量瓶中，然后加入20mL四氯汞钠吸收液浸泡4h以上，若上层溶液不澄清，可加入亚铁氰化钾溶液及乙酸锌溶液各2.5mL，最后用水稀释至100mL刻度，过滤后备用。
③液体样品：如葡萄酒等，可直接吸取5.0～10.0mL样品，置于100mL容量瓶中，以少量水稀释，加20mL四氯汞钠吸收液摇匀，最后加水至刻度混匀，必要时过滤备用。
(2)测定：吸取0.5～5.0mL上述样品处理液于25mL带塞比色管中。另吸取0.00mL、0.20mL、0.40mL、0.60mL、0.80mL、1.00mL、1.50mL、2.00mL SO2标准使用液(相当于0.0μg、0.4μg、0.8μg、1.2μg、1.6μg、2.0μg、3.0μg、4.0μg s02)分别置于25mL带塞比色管中。于样品及标准管中各加入四氯汞钠吸收液至10mL，然后再加入1mL氨基磺酸铵溶液(2g/L)、1mL甲醛溶液(2g/L)及1mL盐酸副玫瑰苯胺溶液摇匀，放置20min。用1cm比色杯，以零管调节零点，于波长550nm处测吸光度，绘制标准曲线比较。
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相关链接：二氧化硫，亚硫酸盐，盐酸副玫瑰苯胺，四氯汞钠
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